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芍药苷的水解动力学研究

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               作者:刘倩,刘永刚,李继安,喇万英

【摘要】  目的考察芍药苷在不同pH条件下的水解情况。 方法Diamonsil-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm);流动相为乙腈-0.1%的甲酸水溶液(15∶85);检测波长为230 nm;进样量为10 μl;柱温为室温,流速为1.0 ml·min-1。结果芍药苷对照品在0.021 5~0.215 μg范围内,进样量与峰面积间呈良好的线性关系,r=0.999 9,并得到不同pH条件下的水解动力方程。结论芍药苷的水解符合一级动力学模型。在不同pH条件下,芍药苷的水解速度不同。

【关键词】  芍药苷; 水解动力学; 高效液相色谱

  Abstract:ObjectiveTo investigate the hydrolysis kinetics of Paeoniflorin in different pH values.MethodsDiamonsil-C18 column(250mm×4.6mm,5μm) was used with the use of the acetonitriler-0.1%formic acid (15∶85)as the mobile phase, the flow rate was 1.0 ml·min-1 and the detection wavelength was set at 230 nm.ResultsPaeoniflorin was well separated,the linear range of paeoniflorin was 0.021 5~0.215 μg (r=0.999 9). Hydrolysis kinetics equations in different pH values was obtained.ConclusionThe degradation follows pseudofirst-order kinetics. Hydrolysis rate is different in various pH values.

  Key words:Paeoniflorin; Hydrolysis Kinetics; HPLC

  白芍为毛茛科植物芍药Paeonia lactiflora Pall.的干燥根,有平肝止痛,养血调经,敛阴止汗的功能[1]。其主要成分芍药苷(Paeoniflorin),具有免疫调节、抑制肿瘤、舒张平滑肌细胞、促进造血细胞增殖等方面的作用[2],而且能明显降低链脲霉素诱发的糖尿病小鼠的血糖[3]。对芍药苷的药理作用及其化学性质已有较多研究,但芍药苷的水解动力学和不同pH下,其水解动力学的变化未见报道。本实验对芍药苷的水解动力学及不同pH值对水解的影响进行了研究,为含有芍药苷的中药及复方的合理提取方法的选择提供依据。

  1 仪器与试剂

  仪器 岛津20A系统,含在线真空脱气机、低压四元梯度泵、自动进样器、柱温箱、二极管阵列检测器、LCsolution色谱工作站。芍药苷(中国药品生物制品检定所110753-200212)。乙腈(美国 Fisher公司),甲酸(分析纯),水为二蒸水,醋酸盐、磷酸盐缓冲溶液,临用现配。

  2 方法与结果

  2.1 液相色谱条件色谱柱为Diamonsil-C18柱(250 mm×4.6 mm,5 μm);流动相为乙腈-0.1%的甲酸水溶液(15∶85);流速为1ml·min-1,检测波长230 nm。

  2.2 标准品溶液的制备精密称取一定量的芍药苷,用甲醇配置成每毫升含0.1mg的溶液,即得。

  2.3 供试品溶液的制备精密称取对照品,少量甲醇溶解后分别加入pH 3.0,5.0,7.0,9.0的缓冲溶液至刻度,恒温加热回流,并在不同的时间点(0.5,1,2,4,6,8h)取样,0.45 μm的滤膜过滤,备用。

  2.4 线性关系的考察精密量取对照品溶液2.0,4.0,8.0,10.0,20.0 ml,置100 ml量瓶中,用甲醇稀释至刻度,摇匀。精密量取上述供试品溶液各10 μl,分别注入液相色谱仪,记录色谱图,得回归方程为Y=29747.81X+6.892,r=0.999 9。结果表明,芍药苷在0.021 5~0.215μg范围内呈良好的线性关系。芍药苷标准品HPLC图谱见图1。

  图1 芍药苷标准品HPLC图谱

  2.5 精密度分别取芍药苷样品液10 ml 6份,按照实验方法,测定峰面积。其RSD为0.28%。

  2.6 稳定性在常温下取芍药苷样品液在不同时间点(1,2,4,6,8h)取样,测定峰面积,其RSD为0.96%。

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