A.齐墩果酸对照品; B.齐墩果酸片样品; C.阴性样品; 1.齐墩果酸
图1 毛细管电泳图（略）
Figure 1 CE chromatograms
2.2 溶液制备
2.2.1 对照品储备液的制备 精密称取齐墩果酸对照品6.6 mg于10 mL量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，以0.22 μm滤膜过滤，即得。
2.2.2 供试品溶液的制备 取供试品20片精密称定，研细，精密称取细粉适量(约相当于齐墩果酸20 mg)置100 mL量瓶中，加甲醇约60 mL，超声30 min，放冷，加甲醇定容刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液。实验前样品溶液经0.22 μm滤膜过滤，备用。
2.3 线性关系
精密量取不同体积“2.2.1”项下的齐墩果酸对照品储备液，分别加甲醇制得质量浓度为2.58、10.3、41.2、82.5、165、330、660 μg·mL-1的一系列对照品溶液，进样测定，以峰面积积分值（A）为纵坐标，质量浓度（ρ）为横坐标，绘制标准曲线，得线性回归方程为：A=0.3523ρ+0.275，r=0.999 7。表明齐墩果酸在2.58～660 μg·mL-1范围内具有良好的线性关系。
2.4 精密度试验
取质量浓度330 μg·mL-1齐墩果酸对照品溶液连续进样6次，结果峰面积积分值的RSD为0.58％，表明精密度良好。
2.5 稳定性试验
取同一供试品溶液，分别在0、4、8、24、72 h进样，记录色谱图，结果峰面积积分值的RSD为0.79%，表明样品溶液在72 h内稳定。
2.6 重复性试验
取同一批号（060106）样品，照“2.2.2”项下的方法制备6份供试品溶液，依上述色谱条件测定含量，结果齐墩果酸平均含量为标示量的97.8%，RSD为0.57%，表明方法重复性良好。
2.7 加样回收率试验
精密称取6份已知含量的供试品细粉适量(相当于齐墩果酸10 mg)，加入齐墩果酸对照品约9.5 mg，按“2.2.2”项下的方法制备溶液，进样测定，计算回收率，结果齐墩果酸的平均加样回收率为99.47% (n=6)，RSD为1.28%,见表1。
2.8 最低检出限和定量限
当信噪比为3时，最低检出限为0.13 μg·mL-1；当信噪比为10时，定量限为0.52 μg·mL-1。
2.9 样品测定
取3个不同批号（060102、060507、060906）的齐墩果酸片，按“2.2.2”项下方法制备溶液，依上述色谱条件进样测定，3批样品的测定结果分别为标示量的97.0%、99.4%、96.8%（n=3)。
表1 回收率试验结果（略）
Table 1 Results of recovery(n=6)
3 讨论
3.1 比较了磷酸盐、磷酸盐硼砂、硼砂硼酸等多种缓冲体系及其浓度对分离效果的影响。结果发现，20 mmol·L-1的硼砂缓冲溶液体系，电泳电流较小，基线平稳，齐墩果酸出峰快(4.10 min)，信号灵敏度高。故选择20 mmol·L-1的硼砂（pH 9.4）作为背景电解质溶液比较理想。
3.2 为改善峰形和提高检测灵敏度，实验添加了适量的有机溶剂。比较了添加不同有机溶剂种类(甲醇、乙醇、乙腈)及体积比例对分离检测的影响。结果表明选用体积分数为5.0％甲醇作为添加剂可有效提高分离度和灵敏度。
3.3 齐墩果酸片收载于《卫生部药品标准》二部第三册，含量测定采用酸碱滴定法，用乙醇制氢氧化钾滴定液，其配制较繁琐，测定终点不明显；采用HPLCUV检测时，由于齐墩果酸为五环三萜类成分，在200 nm处有末端吸收，测定结果受流动相影响大，基线不理想，检测灵敏度较低；毛细管电泳具有快速、准确、操作简便、样品用量少等优势，本实验中，样品的测定在5 min内就能完成，且能克服HPLC法紫外末端检测的不足。
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