HPLC法测定不同产地刺五加叶中绿原酸和金丝桃苷含量

                作者：邵璟,狄留庆,谢新,董宇,赵晓莉,吴灏昕,刘产明 

【摘要】  目的 建立刺五加叶中绿原酸及金丝桃苷的含量测定方法,测定不同产地刺五加叶中绿原酸和金丝桃苷的含量。方法 采用Hedera·ODS-2 C18柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),乙腈-0.4%磷酸(17∶83)为流动相,检测波长为360 nm。结果 绿原酸和金丝桃苷质量浓度分别在10.2～306 μg/mL(r＝0.999 5)和10.4～312 μg/mL(r＝0.999 8)之间,与峰面积均呈良好的线性关系；平均回收率分别为97.14%和98.21%,RSD分别为2.65%和1.89%。不同产地样品中所含的量相差较大。结论 本法操作简便、准确、具有良好的重复性,为刺五加叶的进一步开发应用及质量控制奠定了基础

【关键词】  刺五加叶；绿原酸；金丝桃苷；高效液相色谱法；含量测定

    Abstract：Objective To establish a HPLC method for the content determination of Chlorogenic acid and Hyperoside in the leaves of acanthopanax senticosus from different areas. Methods The samples were separated on Hedera·ODS-2 C18 column, using acetonitrile-0.4% phosphoric acid (17∶83) as mobile phase, the detection wavelength was 360 nm. Result Chlorogenic acid and Hyperoside showed good linear relationship over the ranges of 10.2～306 μg/mL (r＝0.999 5) and 10.4～312 μg/mL (r＝0.999 8), respectively. The average recoveries were 97.14% and 98.21% with RSD at 1.65% and 1.09%, respectively. The contents of Chlorogenic acid and Hyperoside were different obviously in samples from different areas. Conclusion This method is simple, rapid and sensitive, and it can be used for the further development and the quality control of the leaves of acanthopanax senticosus.

    Key words：the leaves of acanthopanax senticosus；Chlorogenic acid；Hyperoside；HPLC；content determination
 
    刺五加为五加科植物刺五加Acanthopanax senticosus (Rupr.et Maxim.)Harms的干燥根及根茎,其茎、叶也可作药用,其主要分布于我国东北、华北及陕西、四川、广西等地。目前对刺五加根及根茎的研究报道较多,而对其叶的研究较少。近年研究表明,刺五加叶中含有丰富的具有广泛药理活性的皂苷类、黄酮类及有机酸类化合物,可进一步开发利用。且目前刺五加野生资源已严重不足,被国家列为三级保护渐危品种。将刺五加叶作为药材深入研究和开发对保护药用刺五加资源具有重要意义。笔者在对不同产地刺五加叶的定性定量试验研究中发现,其中绿原酸和金丝桃苷含量较高,而异嗪皮啶含量较低,且均不含有紫丁香苷。为有效控制不同产地的刺五加叶质量,笔者采用HPLC法同时测定其中绿原酸及金丝桃苷含量。

　　1  仪器与试药

    Agilent-1100型高效液相色谱仪(安捷伦科技有限公司)；Satorious Bp211D精密天平。绿原酸对照品(中国药品生物品检定所,批号110753-200413)；金丝桃苷对照品(中国药品生物制品检定所,批号111521-200303)。甲醇为色谱纯,水为重蒸水(自制),其他试剂均为分析纯。

    刺五加叶分别采自：辽宁丹东、本溪、凤城、东港、恒仁及黑龙江小兴安岭、江苏南京等地区,共收集8批样品,经南京中医药大学中药鉴定教研室鉴定为五加科植物刺五加的干燥叶。

　　2  方法与结果

　　2.1  色谱条件与系统适用性

    色谱柱为Hedera·ODS-2 C18(250 mm×4.6 mm,5 μm)；流动相：乙腈-0.4%磷酸(17∶83)；体积流量：1.0 mL/min；检测波长：360 nm；柱温：30 ℃。在此色谱条件下,刺五加叶中绿原酸和金丝桃苷的保留时间分别为5.3 min和17.9 min,理论塔板数均不低于8 000。色谱峰达到完全分离,绿原酸及金丝桃苷与相邻峰的分离度均大于1.8且峰形对称,见图1。

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