【摘要】 目的 研究绞股蓝总皂苷的提取工艺。方法 采用正交试验设计法,以绞股蓝总皂苷提取量为考察指标,对影响绞股蓝总皂苷提取工艺的因素进行了优选。结果 提取时间、提取次数对提取效果有显著影响,乙醇用量的影响不显著。结论 绞股蓝总皂苷的最佳提取工艺为：药材加8倍量70%的乙醇,回流提取3次,每次2 h。
【关键词】 绞股蓝总皂苷；提取工艺；正交设计
Abstract：Objective To study the extraction techniques of total saponin in Gynostemma. Method According to the total saponin extracting rate, the extracting techniques were optimized by orthogonal design. Results The factors that extracting time and extracting times have significant effect on total saponin extraction, and the amount of alcohol solution has insignificant effect on it. Conclusion The optimal extracting techniques were A1B3C3, refluxing extraction for 3 times with 8 fold 70% ethand, 2 hours for each time.
Key words：Gynostemma total saponin；extracting techniques；orthogonal design
绞股蓝(Gynostemma)为葫芦科绞股蓝属多年生蔓生草本植物,主要含有皂苷、黄酮、多糖,还含有人体必须的多种氨基酸、维生素和微量元素等成分。现代药理学研究表明,绞股蓝具有抑制肿瘤、抗衰老、降低血脂、增强免疫力和保护心脏的作用[1]。绞股蓝总皂苷片作为药品已经上市多年,用于高脂血症,见有心悸气短、胸闷肢麻、眩晕头痛、健忘耳鸣、自汗乏力或脘腹胀满等心脾气虚、痰阻血瘀者。为了最大限度提取并保持绞股蓝的有效成分,保证绞股蓝药材资源的充分利用,提高经济效益,本研究用正交试验优选绞股蓝提取工艺。
1 仪器与试药
UV-2601型紫外分光光度计(岛津)；人参皂苷Rb1对照品(中国药品生物制品检定所)。冰醋酸、高氯酸、甲醇、香草醛、正丁醇、石油醚等均为分析纯。样品：七叶绞股蓝茎叶混合物,产于四川卧龙地区。
2 方法
2.1 标准曲线的制备[2]
精密称取人参皂苷Rb1对照品10 mg置5 mL容量瓶中,加甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀,制成浓度为2.0 mg/mL的储备液。精密量取储备液50、100、150、200、250 μL分别置15 mL具塞试管中,挥干甲醇,分别加入新配置的5%香草醛冰醋酸溶液0.4 mL、高氯酸1.6 mL,摇匀,密塞,置60 ℃水浴中加热15 min后取出,立即用冷水冷却至室温,分别精密加入冰醋酸10 mL,摇匀,作为供试品溶液。另精密量取甲醇溶液250 μL置15 mL具塞试管中,按照上述操作,到加入冰醋酸10 mL摇匀为止,作为空白溶液。取供试品溶液和空白溶液,照分光光度法[《中华人民共和国药典》(一部)附录ⅦA]试验,在560 nm的波长处分别测定吸收度。以人参皂苷Rb1的量X(mg)对吸收度A进行回归,得标准曲线方程为：A=1.275 7X+0.001 9,r=0.998 9。结果表明,当取样量在0.102～0.510 mg范围内时,人参皂苷Rb1的含量与吸收度呈良好的线性关系。
2.2 绞股蓝总皂苷含量测定方法
精密称取绞股蓝总皂苷粉末20 mg置5 mL容量瓶中,加甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀。精密量取200 μL置15 mL具塞试管中,挥干甲醇后按“2.1”项下操作,测定吸收度,用标准曲线计算出绞股蓝总皂苷的含量。
2.3 绞股蓝总皂苷的提取工艺
将干燥的绞股蓝药材粉碎成粗粉,准确称量100 g置圆底烧瓶中,用70%乙醇多次回流提取,合并提取液,用旋转蒸发器浓缩后减压干燥,干燥物用1 000 mL的热水充分溶解,加入同体积的石油醚萃取3次,将水层溶液用同体积的水饱和的正丁醇反复萃取,至正丁醇层无色为止,合并正丁醇提取液,用旋转蒸发器浓缩后减压干燥,即得。
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