作者：芦锰，贺海花，杨云，张寒娟
【摘要】 目的建立茯苓饮片的指纹图谱。方法采用高效液相色谱法测定，乙腈-0.05%磷酸水，梯度洗脱，流速：1.0ml/min，柱温：30℃，紫外检测波长：242 nm。结果茯苓饮片中有11个共有峰被确定为指纹峰，采用“Chromafinger V0.9 beta”软件评价12批茯苓饮片指纹图谱的相似性，相关系数法大于0.840 3，夹角余弦法大于0.906 8。结论该方法简便，稳定，精密度高，重复性好，可用于茯苓饮片的鉴别，能够有效控制饮片质量。
【关键词】 茯苓饮片； 高效液相色谱法； 指纹图谱
Abstract：ObjectiveTo establish HPLC fingerprint of Poria cocos herbs.MethodsHPLC was conducted and the mobile phase consisted of acetonitrile-0.05%phosphoric acid-water was eluted in gradient elution.The flow rate was 1.0 ml/min. The column temperature was at 30℃ and the detection wavelength was 242nm.ResultsThe eleven common peaks of Poria cocos herbs were determined as fingerprint peaks.Similarity was analyzed by Chromafinger V0.9 beta fingerprint analysis software. The results showed that similarity was more than 84.03% by correlation coefficient method and similarity was more than 90.68% by cosine method. ConclusionThis method is simple, stable and reproducible.It can be used to identify and effectively control quality of Poria cocos herbs.
Key words： Poria cocos herbs； HPLC； Fingerprint
茯苓为多孔菌科真菌茯苓Poria cocos (Schw.) Wolf的干燥菌核［1］，具有利水渗湿、健脾安神之功效。主要用于小便不利、水肿；脾虚腹泻、日久不止；痰饮停溜、食欲不振；惊悸、失眠等症。对于茯苓的指纹图谱研究，段启等［2］曾对不同产地茯苓药材进行过高效液相色谱（HPLC）指纹图谱研究，而对于茯苓饮片尤其是经过规范化炮制加工的饮片HPLC指纹图谱研究未见相关报道。因此，本实验对规范化炮制工艺加工的茯苓饮片进行了指纹图谱研究，以期对其质量控制和评价提供有效方法［3］。
1 仪器与试药
1.1 仪器
LC-20AT高效液相色谱仪（日本岛津）；大连伊利特Hypersil-ODS (4.6 mm×250 mm)高效液相色谱柱；工作站：CBM-102；检测器：SPD-20A；TP 600超声波提取器（北京天鹏电子新技术有限公司）；BS210S型电子天平（北京塞多利斯公司）。
1.2 试剂
乙腈为色谱纯，磷酸为分析纯，水为双蒸水（经0.45μm微孔滤膜滤过），其他试剂均为分析纯。
1.3 药材
茯苓药材分别采集于宛西制药有限公司GAP基地、河南商城等地共12批（样品来源及编号见表1）。按照本课题组研究的规范化炮制工艺进行浸泡、润蒸并切制成不同规格。表1 样品来源及编号（略）
2 方法与结果
2.1 色谱条件大连伊利特Hypersil-ODS (4.6 mm×250 mm)高效液相色谱柱；检测器：SPD-20A；工作站：CBM-102；流动相：乙腈-0.05%磷酸水，梯度洗脱（见表2）；流速：1.0 ml/min；柱温：30℃；检测波长：242 nm 。表2 流动相梯度洗脱程序（略）
2.2 供试品溶液的制备
取茯苓饮片，粉碎，过40目筛。取粉末约1.0 g，精密称定，置于具塞锥形瓶中，加95%乙醇25 ml，超声提取20 min，过滤，残渣加95%乙醇重复提取两次，合并滤液并挥干乙醇，用色谱甲醇定容于10 ml容量瓶中，临用前用0.45 μm微孔滤膜过滤，即得供试品溶液。
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