FL-1大孔树脂分离纯化番石榴叶总黄酮工艺研究

            作者：程冰洁　周迎春　黄海军　鄢文　陈宝田　刘强

【摘要】  ：目的 考察FL-1大孔树脂吸附纯化番石榴叶总黄酮的工艺条件及参数。方法 用紫外分光光度法测定番石榴叶总黄酮的含量,以树脂吸附量、上液容量体积为指标考察FL-1树脂的番石榴叶总黄酮的吸附行为。结果 FL-1大孔树脂对番石榴叶总黄酮吸附纯化的最佳条件为：样品中总黄酮的浓度为13.22%,原药材与树脂投量比为1∶4,以70%乙醇作为洗脱剂、洗脱流速为2 mL/min。采用本工艺,番石榴叶总黄酮的得率达30.12%,纯度达55.22%。结论 该工艺简便,适于番石榴叶总黄酮的吸附纯化。

【关键词】  番石榴叶　总黄酮　大孔树脂

　　Abstract：Objective To evaluate the performance of FL-1 macroporous absorption resin for absorption of total flavonoids from Psidium guajava leaf. Methods The concentration of total flavones in Psidium guajava leaf was determined by ultraviolet spectrophotometry and the absorption behavior of FL-1 macroporous adsorption resins to total flavones in Psidium guajava leaf was examined for the adsorption capacity and the volume of solution loaded. Results Optimal absorption of total flavonoids was achieved with the sample：total flavonoids concentration in the solution of 13.22 mg/mL, the ratio of total flavonoids concentration and macroporous adsorption resin was 1∶4, washing with 70% ethanol at the flow velocity of 2 BV/h. Conclusion FL-1 Macroporous absorption resin can be well applicable for enrichment of total flavonoids in Psidium guaijava leaf. 

　　Key words：Psidium guajava leaf；total flavonoids；macroporous adsorption resins

　    番石榴(Psidium guajava L.)是桃金娘科番石榴属果树,在我国广西、福建、台湾、海南、广东等地广泛栽种,夏秋季节采叶。其叶性平、味甘涩,具有收敛止泻、消炎止血的功效。近年来研究发现,番石榴叶对轮状病毒具有抑制作用,且临床疗效较好[1-3]。大孔吸附树脂是近10年发展起来的一类有较好吸附性能的高聚物吸附剂,可广泛应用于有效成分的分离纯化；目前在中药制剂纯化、天然药物中活性成分的提取分离方面也显示出独特的作用[4]。本试验应用FL-1大孔树脂吸附分离技术分离纯化番石榴叶总黄酮。现将有关工艺研究报道如下。

　　1  仪器与试药
   
　　UV2100紫外可见分光光度计(日本岛津)。番石榴叶(广州市郊区,经本校刘强教授鉴定为Psidium guaijava L.)；芦丁对照品(中国药品生物制品检定所,批号100080-200306)。FL-1树脂(欧瑞生物科技有限公司)；其它试剂均为分析纯。

　　2  方法与结果

　　2.1  总黄酮含量测定方法

　　2.1.1  标准曲线的测定 

　　精密称取在120 ℃干燥至恒重的芦丁对照品50 mg,置25 mL量瓶中,加甲醇适量,置水浴上微热使溶解,放冷,加甲醇置刻度,摇匀。精密量取10 mL置100 mL量瓶中,加蒸馏水至刻度,摇匀,作为对照品溶液。精密量取对照品溶液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6 mL分别置25 mL量瓶中,各加蒸馏水至6.0 mL,加5%亚硝酸钠溶液1 mL,混匀,放置6 min,加10%硝酸铝溶液1 mL摇匀,放置6 min,加氢氧化钠溶液10 mL再加蒸馏水至刻度,摇匀,放置15 min,用紫外分光光度法,于波长500 nm处测定吸光度,随行试剂空白,测定3次,绘制标准曲线。以芦丁标准品的浓度(mg/mL)为横坐标,吸光度为纵坐标,绘制标准曲线,得回归方程：Y＝10.925X＋0.001 7 (r＝0.999 8)。

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